Ⅰ imagej測什麼指標時對光線要求高嗎
imagej測指標時對光線要求高。
ImageJ是一個很強大的圖片處理工具，那麼對於我們平時拍的帶有熒光色彩的圖片，想要測量熒光的強度用來進行定量描述，這些都可以用ImageJ來進行完成。
免疫熒光染色是研究特異蛋白抗原在細胞內分布的一種常用實驗技術，通過熒光素所發的熒光可在熒光顯微鏡下對抗原進行細胞定位。
但免疫熒光的照片不僅僅可以做形態學分析，還能通過檢測平均熒光強度，對特異性蛋白表達進行半定量分析。
在進行平均熒光強度檢測之前，首先要清楚平均熒光強度的定義。
對於一張單通道（單色）的熒光圖片，每個像素的灰度值代表了該點的熒光強度大小，特定區域的熒光強度公式：
平均熒光強度(Mean) = 該區域熒光強度總和(IntDen) / 該區域面積(Area)
Ⅱ 如何用image pro plus分析圖像熒光強度
打開Launch Center Pro，創建一個叫Omnifocus的操作組，然後再往這個操作組添加新的操作。
如果你要在 Omnifocus 創建新收件箱項，添加URL到Launch Center Pro即可通過Launch Center Pro快捷創建收件箱項。
在URL一欄輸 入：omnifocus:///add?name=[prompt]添加新的URL快捷進入創建一個新收件箱項
點go就可以直接進入Omnifocus了
如果你想把復制到內容粘貼到新收件箱項，我們還可以創建一個新的快捷操作到Launch Center Pro，命名為粘貼，然後再URL一欄輸入：omnifocus:///add?name=[prompt]¬e=[clipboard]。
Ⅲ 熒光分光光度計測試步驟是怎麼樣的
測試步驟：(一)樣品准備 1.液體樣品根據用戶提供的技術指標，檢查濃度范圍是否合適，如果需要稀釋，則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數。 2.固體樣品均勻粉末、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品，均可直接測定。 (二)操作步驟 1.開機：接通電源，打開主機開關，點燃(打開)光源後，根據說明書要求啟動計算機。 2.檢測前准備：參照儀器說明書，在20天內至少進行一次激發校準和發射校準，檢測前儀器應預熱。 3.工作條件的選擇：環境溫度應在20℃±5℃;相對濕度不大於70%;電源穩定，無磁場、電場干擾。根據樣品的特性及熒光強度，選擇合適的儀器工作條件(如狹縫、PM增益、響應時間等)。 4.基本測定 (1)熒光激發光譜測定 設置儀器參數，掃描發射波長，找到maxλem，以此為發射波長，記錄發射強度作為激發波長的函數，便得到激發光譜。 (2)熒光發射光譜測定 設置儀器參數，掃描激發波長，找到maxλex，以此為激發波長，記錄發射強度與發射波長間的函數關系，便得到熒光發射光譜。 (3)差譜測定 設置儀器參數，選擇合適的工作方式，測定背景溶液的發射光譜並儲存起來，在一定的工作方式下，掃描樣品溶液的發射波長，得到當時的光度值和儲存的背景值之間的差示值，即差譜。 (4)峰面積積分 選擇適當的工作方式，對樣品溶液進行積分操作，即得到峰面積積分。 (5)熒光強度 選擇合適的測量參數，設置λex、λem，採用定點讀數或掃描方式，即可測得所選波長處的熒光強度。 (6)定量測定 配製一系列已知濃度的標准溶液，在一定的測定條件下，設置λex、λem，按照由稀至濃的次序，測定標准溶液的熒光強度，繪制熒光強度—濃度的工作曲線，不改變儀器參數測定未知溶液的熒光強度，由工作曲線即可求出未知溶液的濃度。 (三)分析結果的表述 1.熒光激發光譜、發射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出。 2.峰面積積分、熒光強度由儀器控制電腦計算顯示。 3.定量測試：在相同的測定條件下，測定一系列已知濃度的標准溶液的熒光強度，繪制出熒光強度-濃度的工作曲線。濃度未知的溶液的熒光強度測定後，由工作曲線求出該溶液的濃度。 (四)注意事項 1.在實驗開始前，應提前打開儀器預熱，並配製好所需的溶液，對於已經配製好的溶液，在不用時放在4℃冰箱中保存，放置時間超過一星期的溶液要重新配製。 2.實驗所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時候用手指掐住池體的上角部，不能接觸到四個面，清洗樣品池後應用擦鏡紙對其四個面進行輕輕擦拭。 3.在測試樣品時，注意熒光強度范圍的設定不要太高，以免測得的熒光強度超過儀器的測定上限。 4.實驗結束後，要及時的清理檯面，處理廢液，清洗和放置好樣品池，將下次要用的溶液放回冰箱，並且按規定登記實驗記錄，養成良好的實驗習慣。Ⅳ 如何用ImageJ2x分析熒光強度
imagej等分析共兩步，先用segmentation選出待測區域
，再選熒光參數iod等測量。找個例子一看就懂了。
背景建議在得到數據後再扣。圖片扣背景後再segmentation有的會有問題。
Ⅳ 蔡司熒光需要校準嗎
需要。蔡司熒光只有校準才能正常使用，所以是需要校準的。蔡司熒光顯微鏡是一種用於物理學、生物學、地球科學領域的分析儀器。
Ⅵ 怎麼用PS軟體看圖片熒光強度
看不了。用PS軟體查看不了看圖片的熒光強度，PS軟體是一種能夠隨意修改圖片的強大軟體，它可以將圖片修改為熒光效果，但是目前PS無法查看圖片的熒光強度。
Ⅶ 求教如何測熒光強度
熒光光度計的兩個單色器是不同的，一個叫做激發單色器，一個叫做發射單色器。在光路中是這樣的，光源燈發出的光進入激發單色器中，然後進入樣品池，激發樣品中的物質發射出熒光，然後在樣品池中呈90°角的方向，發射出的熒光進入發射單色器，然後再進入接收器得到熒光強度。激發單色器是用來激發物質的熒光，在某個波長，被測物質有最大的吸收，和可見分光光度計類似。發射單色器是熒光在某個波長上熒光強度是最大的。一般被測物質的發射波長比激發波長大。
Ⅷ 免疫熒光如何做定量分析
和免疫組化一樣，只能通過軟體分析得出一個「數值」，可以當一個「半定量」的指標，但我認為准確性差，如果是要分析蛋白的表達情況，建議用western比較好些。統計熒光強度的軟體沒有用過，以前只用過免疫組化的光密度分析軟體，影響結果的因素太多了。。。。。
Ⅸ 熒光分析法中還可以根據哪些參數進行定量
X射線熒光光譜法進行定量分析的依據是元素的熒光X射線強度I1與試樣中該元素的含量Wi成正比：
Ii=IsWi （10.2）
式中，Is為Wi=100%時，該元素的熒光X射線的強度。根據式(10.2)，可以採用標准曲線法，增量法，內標法等進行定量分析。但是這些方法都要使標准樣品的組成與試樣的組成盡可能相同或相似，否則試樣的基體效應或共存元素的影響，會給測定結果造成很大的偏差。所謂基體效應是指樣品的基本化學組成和物理化學狀態的變化對X射線熒光強度所造成的影響。化學組成的變化，會影響樣品對一次X射線和X射線熒光的吸收，也會改變熒光增強效應。例如，在測定不銹鋼中Fe和Ni等元素時，由於一次X射線的激發會產生NiKα熒光X射線，NiKα在樣品中可能被Fe吸收，使Fe激發產生FeKα，測定Ni時，因為Fe的吸收效應使結果偏低，測定Fe時，由於熒光增強效應使結果偏高。但是，配置相同的基體又幾乎是不可能的。為克服這個問題，目前X射熒光光譜定量方法一般採用基本參數法。該辦法是在考慮各元素之間的吸收和增強效應的基礎上，用標樣或純物質計算出元素熒光X射線理論強度，並測其熒光X射線的強度。將實測強度與理論強度比較，求出該元素的靈敏度系數，測未知樣品時，先測定試樣的熒光X射線強度，根據實測強度和靈敏度系數設定初始濃度值，再由該濃度值計算理論強度。將測定強度與理論強度比較，使兩者達到某一預定精度，否則要再次修正，該法要測定和計算試樣中所有的元素，並且要考慮這些元素間相互干擾效應，計算十分復雜。因此，必須依靠計算機進行計算。該方法可以認為是無標樣定量分析。當欲測樣品含量大於1%時，其相對標准偏差可小於1%。
Ⅹ 熒光物含量測定方法的定量測定
熒光分析法的定量測定方法較多，可分為直接測定法和間接測定法兩類。
a.直接測定法：
利用熒光分析法對被分析物質進行濃度測定，最簡單的便是直接測定法。某些物質只要本身能發熒光，只須將含這類物質的樣品作適當的前處理或分離除去干擾物質，即可通過測量它的熒光強度來測定其濃度。具體方法有兩種。
1. 直接比較法：配製標准溶液的熒光強度Fx，已知標准溶液的濃度Cs，便可求得樣品中待測熒光物質的含量。
如果空白溶液的熒光強度調不到零，則必須從Fs和Fx值中扣除空白溶液的熒光強度F0，然後進行計算。
2. 標准曲線法：將已知含量的標准品經過和樣品同樣處理後，配成一系列標准溶液，測定其熒光強度，以熒光強度對熒光物質含量繪制標准曲線。再測定樣品溶液的熒光強度，由標准曲線便可求出樣品中待測熒光物質的含量。
為了使各次所繪制的標准曲線能重合一致，每次應以同一標准溶液對儀器進行校正。如果該溶液在紫外光照射下不夠穩定，則必須改用另一種穩定而熒光峰相近的標准溶液來進行校正。例如，測定維生素B1時，可用硫酸奎寧溶液作為基準校正儀器。
b、間接測定法：
有許多物質，它們本身不能發熒光，或者熒光量子產率很低，僅能顯現非常微弱的熒光，無法直接測定，這時可採用間接測定方法。
間接測定方法有以下幾種：
1.化學轉化法：通過化學反應將非熒光物質變為適合於測定的熒光物質。例如金屬與螯合劑反應生成具有熒光的螯合物。有機化合物可通過光化學反應、氧化還原、偶聯、縮合反等應，使它們轉化為熒光物質。
2.熒光猝滅法：這種方法是利用本身不發熒光的被分析物質能使某種熒光化合物的熒光猝滅的性質，通過測量熒光化合物熒光強度的下降，間接地測定該物質的濃度。
3.敏化發光法：對於很低濃度的分析物質，如果採用一般的熒s光測定方法，其熒光信號太弱而無法檢測，可使用一種物質（敏化劑）以吸收激發光，然後將激發光能傳遞給發熒光的分析物質，從而提高被分析物質測定的靈敏度。
