㈠ cellsens dimension 软件在免疫组化照相时候怎么将标尺显示在图片（保存的图片）上求大神指导..
保存图片时，以.jpg的格式保存就好了
㈡ 免疫组化图片如何加标尺
保存图片时，以.jpg的格式保存就好了。
免疫组化，是应用免疫学基本原理抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理。
通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
标尺是光学计量仪器的长度标准，它广泛应用于测量长度的仪器中，如工具显微镜、测长仪、测量机等。第一机械工业部已制定了玻璃标尺的标准，以供选择时参考。
㈢ 免疫组化照片怎样剪裁，就是发表文章时，怎样处理自己拍下来的免疫组化照片
一切以能客观展示你的实验结果为基础，有的科研工作者采用局部放大，叠加照片(整体照片放大倍数正常，局部照片放大倍数高)的形式进行展示，也是一个不错的展示方法。
下图是义翘的典型IHC结果，可以作为参考。祝顺利
㈣ 2020-09-07 免疫组化组图
好不容易组了一个16张图的组化，保持清晰度的同时，亦要方便后面调整。使用PS心得如下：
1.之前显微镜拍摄的图片一定要命名好样本的类型、组别名称、放大倍数、部位、统一拍摄像素；
2.使用的是leica明场显微镜，首选储存使用TIFF格式，方便以后调整，一开始我使用jpeg贪图文件较小，其实后期不方便PS调整，因为jpeg压缩导致丢失过多的细节，后期基本用不了；
3.选出需要上图的照片，PS上裁剪成大小固定的一张张图片，我统一将400倍的照片裁剪成13.5cm X 13.5cm格式，调节曝光、色相、对比度、饱和度等与同组的照片一致的色彩，另存为到新的工作文件夹中，然后重命名原始文件，标记上“已使用”，这点非常重要，否则时间长了，重复使用图片被发现是学术不端行为；
4.PS新建目标SCI杂志要求的画板大小（17cm宽，高不超过22cm），上图，编排好顺序，如果不同部位的色彩差太远，可以“图像--调整--匹配颜色”；
5.组好之后，保存成.psd，方便以后调整，图片数据不会丢失。将画板大小调整合适，输出一张tiff格式的组合照；
6.下一步就是将tiff导入AI进一步组合柱状图及标出名称分组等信息了。
类似如下图的样式：
㈤ 如何用imagej分析免疫组化平均光密度值
1、打开Image-Pro Plus 6.0软件，点击右下方的Done。点击file，点击open，打开你要选择组化图片，点击打开，得到如图所示。
㈥ Image pro-Plus6.0软件处理免疫组化半定量时,怎么拍照,病理科的显微镜上能直接拍照么,求大侠指点
听起来，楼主的图像处理软件不负责拍照，也不具备拍照功能。楼主只要看清楚它能够识别哪些格式的图像文件即可。
显微镜上拍照完全可能，此类的配置在实验室与病理科也很常见，但我怎么知道楼主所说的那一台是否安装有相机呢？？
㈦ 免疫组化IPP分析
1.图片来源。DAB显色的免疫组化图片
2.输出的结果。
3.光密度（OD）反映蛋白的量。
灰度值：黑0----白255。
步骤
1.光密度校正。具体步骤很容易查到。
2.设置测量参数。 area 和IOD
面积过滤值=100
显示选项中：
NO fill holes， smooth=2，
3.保存测量环境文件
4.手工描绘测量区域
5.选择色彩。选择HSI
H:0-29
S:不动
I:MAX=光密度校正的背景值相同（靠近255一端）
根据图片的显色，可以适当微调HSI
最后保存选色文件。file-save-
6.设置数据收集器
image----name
count/size----area(---sum) and IOD(---sum)
7.测量
测量选择区域面积：edit-count aoi to objects
在data collector中读取测量数据
然后，delete 测量
重新点AOI自主描绘窗口工具，之前画的框就会自动出现
点击count---在data collector中读取测量数据
8.数据整理
同一样品不同视野的结果取均值=一份样品的结果
同一处理组的不同样品的结果进行统计分析。
1.图片的拍摄条件不能变。相同光亮，相同放大倍数，相同曝光条件。
2.不能使用自动拍照功能，必须手动拍照。
3.曝光条件。将空白区域调整到视野中央，通过曝光，使灰度值在230左右，然后校正白平衡，使它显示纯白色。
㈧ 此图片是免疫荧光还是免疫组化出来的结果文章原文是如下描述的。
后面两个图显然是组织免疫荧光，用EET处理后黑色素瘤细胞转移至肺，肝，肾，取肺和肝的组织，切片后（可能是冰冻切片），直接在荧光显微镜下观察拍照。由于GFP自带绿色荧光，在荧光显微镜下，直接可以见到转移的GFP标记的黑色素瘤细胞。
㈨ 免疫组化原理、流程及结果分析
免疫组化原理
免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合，然后用HRP等标记的二抗与一抗进行结合，最后通过与DAB显色剂反应，进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的。
免疫组化更多的意义在于查看目的蛋白的定位。定量一般用western来实现。
免疫组化染色和HE染色的不同之处可能是HE染色比较粗略地辨认不同细胞形态学改变；而后者能够针对特异性细胞标志物来检测特异性细胞的改变（数量）、也可检测细胞内细胞因子的转位，组织中一些特异性蛋白的表达的量改变（通过图像分析系统分析颜色深浅、分布的面积等综合分析）。
通俗的讲，HE仅仅是看大体病理改变，比如组织坏死，比如炎性渗出。免疫组化，看你的目的蛋白的表达情况。
免疫组化和****HE****染色的对比
DAB和HE一样也是一种染色剂，HE染色相对简单，能分辨出细胞中的嗜酸嗜碱性物质；DAB染色全称应该叫做免疫组化DAB染色，经过一系列复杂的生化反应后，DAB(二氨基联苯胺)染色剂能将辣根过氧化物酶染成棕色。
常用的免疫组化染色方法:
组化用HRP的话，信号不够强。通常用生物素标记HRP来增强信号。
1、 ABC法（卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法）
ABC法是利用卵白素与生物素特有的高度亲和力特性，与生物素化二抗结合，形成抗原＋特异性抗体＋生物素化二抗＋卵白素＋生物素＋HRP复合物，最后DAB显色。
复合物配制：先将生物素与酶结合，形成生物素化HRP，以生物素化HRP与卵白素按一定比例混合，形成卵白素-生物素-过氧化物酶复合物。
2、 SP法（抗生物素蛋白链酶素-过氧化物酶复合物）
本身没有连接生物素，但有两个生物素亲和力极高的结合位点，可以与二抗上的生物素结合，敏感性高，复合物不需要使用前混合，更为简便。
3、 PAP法
4、 直接法
样本制备
免疫组化结果分析
免疫组化结果的判断原则：
1 、必须设阳性对照和阴性对照。
2 、 抗原表达必须在特定部位。
3 、 阴性结果不能视为抗原不表达。
免疫组化染色实验组与对照组结果分析表
从表可以看出只有6、7实验结果有意义。1-5均因对照组的结果已否定Ab的特异性或IHC技术操作存在错误等而使实验结果失去意义，必须重复实验或换用Ab。
染色失败的几种情况及原因:
1、 所染的全部切片均为阴性结果，包括阳性对照在内。
2、 所有切片均呈阳性反应。
3、 所有切片背景过深。
4、 阳性对照染色良好，检测的阳性标本呈阴性反应。
所有切片呈阳性反应，其原因:
1、 切片在染色过程中抗体过浓，或干片了。
2、 缓冲液配置中未加氯化纳和PH值不准确， 洗涤不彻底。
3、 使用已变色的呈色底物溶液，或呈色反 应时间过长。
4、 抗体温育的时间过长。
5、 H 2 O 2 浓度过高，呈色速度过快且粘附剂太厚。
所有切片背景过深，其原因:
1、 内源性过氧化酶没有完全阻断。
2、 切片或涂片过厚。
3、 漂洗不够。
4、 底物呈色反应过久。
5、 蛋白质封闭不够或所用血清溶血。
6 、使用全血清抗体稀释不够。
阳性对照染色良好，检测的阳性标本呈阴性反应。
最常见的原因:标本固定和处理不当。
注意事项：
1、 苏木素复染时间需要摸索，尤其要考虑阳性染色的位置。
2、 切片脱蜡和水化要充分；加反应液时要覆盖组织充分；每次加液前甩干洗涤液，但又防止干片。
3、 以下原因可能导致片子着色不均匀：
①脱蜡不充分。可以60℃烤20min，立即放入新鲜的二甲苯中。
②水化不全。应经常配制新鲜的梯度乙醇。
③抗体没混匀。用移液器充分混匀一抗/二抗等试剂。④抗体孵育时，切片放倾斜。
⑤抗体孵育后PBS冲洗不充分。
⑥制片厚薄不均匀等问题。
⑦染片盒不平，切片倾斜。
4、 一抗的清洗:
1、单独冲洗，防止交叉反应造成污染。
2、温柔冲洗，防止切片的脱落，推荐用浸洗方式。
3、冲洗的时间要足够，才能彻底洗去 结合的物质。
5、 PBS的PH和离子强度的使用：
1、建议PH在7.4-7.6浓度是0.01 M。
2、中性及弱硷性条件（PH7-8）有利 于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利 于分解。
6、 拍照：
1、有条件的话应该立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。
㈩ ImageJ 如何除去镜头等设备造成的免疫组化图片背景干扰
在日常科研中，我们经常会遇到仪器使用时间过长后，拍出来的组化片子背景中有各种阴影（如下图中右侧阴影）
同时我拍了一张没有组化片子的纯背景图，也可以看到右侧确实有明显的阴影。
其实有很多工具可以达成目的，我这篇文章主要集中在ImageJ如何操作可以消除背景中的阴影。
打开image J，依次点击process-calculator plus，然后按照下图进行设置，图1位置放染色的片子，图2位置放拍的背景图，然后点击OK，就可以完成操作了
下面放上最后的结果图